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無菌實驗室-動物實驗室-無菌車間設(shè)計規(guī)范及標(biāo)準(zhǔn) 上海

時間:2021-07-30 點擊:3246次

無菌實驗室-動物實驗室-無菌車間設(shè)計規(guī)范及標(biāo)準(zhǔn)


根據(jù)實驗動物微生物控制標(biāo)準(zhǔn),可將實驗動物分為四級:

 普通動物(CV),系指微生物不受特殊控制的一般動物。要求排除人獸共患病的病原體和積少數(shù)的實驗動物烈性傳染病的病原體。為防止傳染病,在實驗動物飼養(yǎng)和繁殖時,要采取一定的措施,應(yīng)保證其用于測試的結(jié)果具有反應(yīng)的重現(xiàn)性(即無論不同的操作人員,在不同的時間,用同一品系的動物按規(guī)定的實驗規(guī)程所做的實驗,都能獲得幾乎相同的結(jié)果)。

二級 清潔動物(CL),要求排除人獸共患病及動物主要傳染病的病原體。

三級 無特殊病原體動物(SPF),要求到二級外,還要排除一些規(guī)定的病原體。其除菌與滅菌的方法,可使用空氣過濾器除菌法、紫外線滅菌法、三甘醇蒸氣噴霧法及氯化鋰

水溶液噴霧法。

四級 無菌動物(GF)或悉生動物(GN)。無菌動物要求不帶有任何用現(xiàn)有方法可檢出的微生物。悉生動物要求在無菌動物體上植入一種或數(shù)種已知的微生物。在病理學(xué)檢查上,

四類實驗動物也有不同的病理檢查標(biāo)準(zhǔn)。

 外觀健康,主要器官不應(yīng)有病灶。

二級 除指標(biāo)外,顯微鏡檢查無二級微生物病原的病變。

三級 無特殊病原體動物。無二、三級微生物病原的病變。

四級 不含二、三級微生物病原的病變,脾、淋巴結(jié)是無菌動物組織學(xué)結(jié)構(gòu)。

綜合上述,對不同的實驗動物在動物房設(shè)計上和管理上則有不同的要求。無菌、已知菌以及無特殊病原體動物都需要在無菌或盡可能無菌的環(huán)境里飼養(yǎng),這種環(huán)境

目前上通用稱為屏障環(huán)境,即用一道屏障把動物與周圍污染的環(huán)境隔開,就如胎鼠在母鼠子宮內(nèi)一樣。這種環(huán)境從控制微生物的角度分為隔離系統(tǒng)、屏障系統(tǒng)、半屏障系統(tǒng)、開放系統(tǒng)和層流架系統(tǒng)等五大類。

A隔離系統(tǒng) 是在帶有操作手套的容器中飼養(yǎng)動物的系統(tǒng),用于飼養(yǎng)無菌動物和棲生動物。內(nèi)部保持按微生物要求的100級的潔凈度,但其設(shè)置的房間及操作人員不必按無菌室考慮。

B屏障系統(tǒng) 把10000~100000級左右的無菌潔凈室作為飼養(yǎng)室,主要用于無特殊病原體動物的長期飼養(yǎng)和繁殖。入室施行嚴(yán)格管理,如淋浴、換貼身衣服等。

C半屏障系統(tǒng) 放寬對屏障系統(tǒng)中人及物出入房間時的管理,平面組成大致與屏障系統(tǒng)相同

D層流架系統(tǒng) 籠具放在潔凈的水平層流空氣中。常用于小規(guī)模飼養(yǎng),但在一般房間進(jìn)行飼養(yǎng)、操作和處理時有被污染的危險性??捎糜诎肫琳系难a充。

E開放系統(tǒng) 是對人、物、空氣等進(jìn)出房間均不施行消除污染的系統(tǒng),但通常要進(jìn)行某種程度的清潔管理。

下列出了各種系統(tǒng)對 實驗動物環(huán)境指標(biāo)的要求:

項目 指標(biāo)

開放系統(tǒng)(CV)簡易屏障系統(tǒng)(CL)屏障系統(tǒng)(SPF)隔離系統(tǒng)(GF,GN

溫度/℃ 18~29 18~29 18~29 18~29

日溫差/℃ 8 3 3 3

相對濕度/% 40~70 40~70 40~70 40~70

換氣次數(shù)/(次/h) 10~15 10~15 10~15

氣流速度/m/s) 018 018 018

壓差/Pa 20~50 20~50 20~50

潔凈度/級 10萬 1萬 100

菌落數(shù)/[/(皿·h] 122 245 049

氨的質(zhì)量濃度/mg/m314 14 14 14

噪聲/dB ≤60 ≤60 ≤60 ≤60

照度/lx 150~300 150~300 150~300 150~300

達(dá)到動物房環(huán)境指標(biāo)的凈化措施有:

A空氣凈化系統(tǒng) 因為動物房是實驗動物較長時間活動的場所,室內(nèi)不可能在飼育條件下經(jīng)常用薰蒸沖洗的方式滅菌,一般只能用藥力較弱的消毒液檫洗,在這種情況下為了避免微生物侵染,保證空氣凈化則是要條件;

B.風(fēng) 防止交叉污染和除臭是兩個難題,為此,凈化空調(diào)系統(tǒng)大部分必須采用風(fēng)方式,但由于凈化系統(tǒng)換氣次數(shù)大,又是風(fēng),所以能耗問題;

C.除臭 這不僅是對外部環(huán)境和工作人員所必須,而且也是實驗動物本身所必須。因為室內(nèi)除外界微生物污染外,動物本身排泄物和微生物二次轉(zhuǎn)化生成的氨、硫化氫、醇等氣體,

也是重要的污染物質(zhì).

二.動物房一般環(huán)境因子控制范圍

1) 溫度 目標(biāo)值為21~27℃。藥典規(guī)定為17~28℃??梢騽游锲贩N而不同。

2) 濕度 45%~55%。衛(wèi)生部規(guī)定為40%~60%。

3) 氣流速度 10~25cm/s。避免直接吹風(fēng)。

4) 換氣次數(shù) 6~15/h。新風(fēng)為2/3。

5) 氣壓 潔凈區(qū)正壓,感染區(qū)負(fù)壓。

6) 環(huán)境潔凈 一般動物飼養(yǎng)室大于100000級。

7) 照明 150~300lx(人工照明)。

8) 噪音 40~50dB(無動物時),有動物時為60 dB,衛(wèi)生部規(guī)定小于70 dB

9) 臭氣 氨20ppm。

三.動物房設(shè)計的基本要求

1) 選址 僻靜、衛(wèi)生

2) 布置 分為準(zhǔn)備區(qū)、飼養(yǎng)區(qū)、實驗區(qū)。要求人流、物流、動物流分開(單向流程);

要求凈化、滅菌、防蟲。

3) 建筑 要求有潔凈走廊,飼養(yǎng)室,污染走廊以及其他各無塵室。

4) 空調(diào)系統(tǒng) 有可控制的溫度和濕度、氣流速度和分布,有一定的換氣量和氣壓。

5) 照明 無窗動物房使用熒光燈,有窗動物房可安裝玻璃窗,以濾去紫外線。要求12

H亮,12h暗。

6) 供水 有飲用水和精制水。

四.動物房的設(shè)置

根據(jù)不同種類和不同實驗動物的需要,建立相應(yīng)設(shè)施的動物房、活動場所和相應(yīng)的輔助用房。場址應(yīng)選在能保持安靜、清潔、無外界影響的地方。動物房必須光線充足、通風(fēng)良好、地面整潔,不積水;頂棚、墻壁要易于清潔、消毒;外墻,屋頂、頂棚、門窗及通外面的管道等必須杜絕外界動物、蚊蠅及其它蟲害鉆入。室內(nèi)溫度控制在18~29℃,相對濕度40%~70%,噪音60 dB以內(nèi)?;\內(nèi)動物密度不能太大,要有送風(fēng)、排風(fēng)、降溫及保暖設(shè)備。必須有的排污、排水設(shè)施,防止病原擴散。各種籠具要定期清洗消毒,墊料須經(jīng)高溫高壓或藥物消毒并及時更換,使室內(nèi)氨濃度在15mg/m3以下。

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